Resumen:
El objetivo de este trabajo fue la clonación y expresión de la enzima 1-
aminociclopropano-1-carboxilato sintasa (ACCS) en Escherichia coli. Esta enzima forma
parte de la ruta de la biosíntesis del etileno en plantas y cataliza la transformación de Sadenosil-
metionina en ácido 1-aminocicloprano-1-carboxílico (ACC). Se ha demostrado
que el ACC ayuda a la producción exógena de etileno en las plantas superiores y podría
sustituir el uso del ácido 2-cloroetilfosfónico.
A través del uso de endonucleasas de restricción se clonó el fragmento de ADN que
codifica para la enzima ACCS en el vector pColdI. Bacterias quimiocompetentes de E.
coli se transformaron con este ADN recombinante mediante choque térmico. La
sobreexpresión de la proteína se realizó al inducir cultivos que ya contaban con el ADN
recombinante de ACCS clonado en el vector pColdI y se visualizó mediante una
electroforesis de gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (SDS).
La proteína se observó en un peso aproximado de 48 kDa tal y como se hace referencia
bibliográficamente, su expresión fue abundante en comparación con los cultivos que no
se indujeron y con los controles que no contenían el ADN recombinante.
