Abstract:
Se caracterizó a P. chlororaphis ATCC 9446 mediante cinéticas de crecimiento para
encontrar cuál era su tasa de crecimiento en medio mínimo (M9) y medio
enriquecido (LB) así mismo se evaluó en efecto que le produce a P. chlororaphis
cuando se le aplica un flujo de aire al medio mínimo mientras este en pleno
crecimiento dicha cepa. Se observó que la cepa ATCC 9446 presenta una mejor
tasa de crecimiento cuando está bajo la influencia de aireación. También se evaluó
cual era la velocidad de crecimiento que presenta P. chlororaphis cuando está
creciendo en medio enriquecido y se encontró que la tasa de crecimiento de la cepa
ATCC 9446 es similar a la de E. coli, esta cinética se realizó en lector de placas. Así
mismo se determinó el contenido de proteína que produce P. chlororaphis y el valor
de RNA que genera. Los cálculos para la determinación de Proteína y RNA se
realizaron con ayuda del factor OD-peso seco obtenido durante la evaluación de la
cinética en matraces. A partir de esto se observó que la cepa ATCC 9446 si cumple
con lo reportado por Scott (2010) quien menciona que a mayor velocidad de
crecimiento hay mayor producción de RNA. Previamente se realizó una
transformación por electroporación a la cepa P. chlororaphis ATCC 9446 insertando
un plásmido con resistencia a gentamicina (pUCP 24), debido a que en estudios
previos se observó que P. chlororaphis es resistente a carbenicilina, cloranfenicol,
estreptomicina, spectomicina y zeocina, mientras que es sensible a gentamicina,
apramicina, tetraciclina y kanamicina. Posteriormente se calculó la eficiencia de
transformación de P. chlororaphis de E. coli DH5α, la alta eficiencia obtenida
concuerda con lo reportado por Wirth (1989) que indica que se obtienen altas
eficiencias de transformación mediante el método de lavados con sacarosa a 300
mM. De acuerdo a nuestros resultados, el método que mayor eficiencia de
transformación es por conjugación debido a que se obtuvieron células incontables.
